Lichtmicroscopie

Het GI beheert twee omgekeerde confocale laser-scanningmicroscopen (CLSM) met gevoelige puntdetectors, meerdere specifieke lasergolflengtes, en programmeerbare lange-termijnexperimenten (bijv. overnacht, meerdaags). Confocale microscopie is geschikt voor het “optisch segmenteren”, waarmee acquisitie van zeer dunne laagjes in objecten en het 3D-reconstrueren van ruimtelijke structuren mogelijk wordt. Incubatie met temperatuur-, koolzuur- en luchtvochtigheidsregulatie is beschikbaar voor één van de systemen, evenals “Lightning-computational clearing”.

• Leica SP8x WLL
• Leica SP8 Liachroic 

Het GI beheert een spinning-disc superresolutiemicroscoop die een combinatie biedt van snelheid, superresolutie (120 nm) en photobleaching (FRAP), alsmede het opnemen van twee kanalen tegelijkertijd. Een compleet uitgerust incubatiesysteem maakt live-cell imaging mogelijk. Deze microscoop kan gebruikt worden voor het bestuderen van hele snelle, hele kleine objecten in levende cellen en daarnaast ook voor het meten van moleculaire dynamica (bijvoorbeeld diffusie of mobiele / immobiele fracties) in gewenste regio’s van geobserveerde structuren.

• Nikon SoRa spinning disc with FRAP

Het Gemeenschappelijk Instrumentarium beschikt over twee geavanceerde omgekeerde widefield-microscopen die geschikt zijn voor bijvoorbeeld dunnere monsters of coupes, en die zijn uitgerust met hoogwaardige camera’s om met hoge snelheid grotere gebieden of snelle dynamica op te kunnen nemen. Deze systemen kunnen geprogrammeerd worden om automatisch meerdere en langdurige opnames te maken. Naast filters voor de typische fluorescentiegolflengtes, zijn ze ook uitgerust met fase-contrast, differentïeel-interferentiecontrast- (DIC) en/of polarisatiefilters. Op beide systemen is temperatuurincubatie beschikbaar. Eén widefieldmicroscoop is uitgerust met “Thunder-computational clearing” om de beeldscherpte nog verder te verhogen.

Ten tweede staat er bij ons ook één relatief eenvoudige, rechtopstaande widefield-microscoop voor de gebruikelijke fluorescentiegolflengtes alsook brightfield-microscopie, die handmatig bediend moet worden. Deze is uitgerust met een digitale kleurencamera en een monochroomcamera.

GI biedt ook een TIRF-microscoop, die naast typische widefield-microscopie ook geschikt is voor het observeren van processen die zich direct bovenop het dekglas bevinden, binnen een laag van orde-grootte 100 nm. Deze techniek kan uitkomst bieden bij het observeren van bijvoorbeeld exclusief het celmembraan van levende cellen.

Naast onze specifiek voor widefield bedoelde systemen, kunnen onze confocale microscopen ook vrijelijk naar de widefield-modus omgeschakeld worden, waar met standaard excitatie- en emissiefilters ook epifluorescentiemicroscopie uitgevoerd kan worden.

• Leica Thunder
• Leica DM2500
• Leica "Timelapse" widefield
• Nikon TIRF widefield

Een tweezijdig belichtend light sheet-systeem met 4 typische lasergolflengtes is bij ons opgesteld. Het systeem is specifiek geschikt voor 3D-opnames van onder andere gehele levende of gefixeerde structuren en organismen zoals zebravislarven, jonge planten, of transparant gemaakte hersenstructuren (iDisco) voor welke het belangrijk is dat de laserbelichting qua intensiteit en volume geminimaliseerd wordt, en waar sub-cellulaire resolutie minder belangrijk is. De monsters kunnen worden geobserveerd in een breed spectrum aan brekingsindexen, van water tot aan organische oplosmiddelen. De light sheet-microscoop kan worden gebruikt voor combinaties van tile-scanning, time-lapse en/of rotationele acquisitie. Monsters ter observatie kunnen een grootte hebben van maximaal 1 x 1 x 1 centimeter.

• PhaseView Alpha3