Radboud Zebrafish Facility

Het Radboud Institute for Biological and Environmental Sciences heeft aquaria waar onderzoek wordt gedaan met zebravissen als diermodel. Onderzoeksgroepen van de Radboud Universiteit en Radboudumc werken samen in multidisciplinaire onderzoekslijnen om de impact van het model te verbeteren.

Zebravissen (Danio rerio) zijn een breed erkend gewerveld modelorganisme in wetenschappelijk onderzoek en hebben zowel fundamentele als translationele betekenis. Het onderzoek in onze faciliteit bestrijkt en integreert genregulatie, celsignalering, weefselfunctie en de fysiologie van het hele organisme.

Voor wie?

Wij staan open voor en zoeken voortdurend naar samenwerkingen met zowel interne als externe partijen in gezamenlijke projecten, strategische allianties en uitwisseling van expertise. We bieden advies, begeleiding en ondersteuning bij het uitvoeren van zebravisonderzoek, inclusief experimenteel ontwerp, het gebruik van geavanceerde technologieën en de verzorging en omgang met vissen.

Highlights

Zwaartekrachtsubsidie voor onderzoeken naar therapieën bij blindheid, aanpassingsvermogen bij crises (25 maart 2024)
Viskweek kan op simpele manier duurzamer (27 september 2023)
Meer inzicht in afwijkingen aan het aangezichtsskelet door zebravis-onderzoek (13 maart 2023)

Ontdek meer nieuws over Radboud Zebrafish Facility

Vissen en aquaria

De faciliteit biedt hoogwaardige verzorging van zebravissen in verschillende moderne huisvestingssystemen en heeft momenteel meer dan 10.000 vissen, inclusief verschillende wildtype stammen, visueel detecteerbare transgene rapportagelijnen en mutanten met verlies- en winstfunctie fenotypes.

Onze vissen worden gehuisvest in recirculatiesystemen die automatische watercirculatie, biologische filtratie en UV-C-behandeling bieden. Alle systemen zijn uitgerust met geautomatiseerde monitor- en besturingseenheden die waterkwaliteitsparameters zoals pH, geleidbaarheid en temperatuur meten. Daarnaast worden technische parameters continu bewaakt, zoals de werking van pompen en de waterniveaus en -stroming.

Foto van een micro-injectie van een zebravisei met een klein naaldje

Embryo's en larven worden in incubators gehouden onder gecontroleerde temperaturen en licht/donker cycli. We gebruiken gebruiksvriendelijke software om onze zebravisvoorraden te beheren, waterkwaliteitsparameters vast te leggen, fokprogramma's bij te houden en dagelijkse gezondheidsinspecties uit te voeren. We hebben drie volledig getrainde dierenverzorgers die verantwoordelijk zijn voor de verzorging van de vissen, het fokken en het opzetten van op maat gemaakte experimentele opstellingen.

Technieken en expertise

Omdat apparatuur en kennis in onze faciliteit worden gedeeld, hebben leden toegang tot een breed scala aan technologieën en expertise. We kunnen ook ondersteuning bieden bij het ontwerpen van nieuwe experimenten en benaderingen.

Generatie van genetisch gemodificeerde zebravissen

De zebravis is uitermate geschikt voor in vivo functionele karakterisering van genfunctie en genvarianten. Binnen de faciliteit hebben we ruime ervaring met het opzetten van gen knock-out en (gehumaniseerde) knock-in modellen met behulp van CRISPR/Cas-gemedieerde genoombewerking. We beschikken over meerdere microinjectie-opstellingen die RNA-geleide CRISPR/Cas-gemedieerde gerichte mutagenese mogelijk maken, en we hebben een zeer efficiënte pijplijn opgezet voor de ontwikkeling en genetische evaluatie van CRISPR-gemodificeerde zebravismodellen.

Daarnaast hebben we ervaring met het genereren van transgene zebravislijnen met behulp van de Tol2- en PhiC31-integrase-genafgiftesystemen. Met deze tools kunnen we snel de expressie van genetische therapieconstructies of celspecifieke fluorescerende reporter-eiwitten in zebravissen induceren.

Gedragstesten

Gedrags- en activiteitspatronen van zebravissen zijn basismetingen die in veel studies worden gebruikt. Ze kunnen informatie onthullen over stereotiep gedrag, circadiane ritmiek, motorische controle, bewegingsstoornissen, neurale ontwikkeling, thermische voorkeur en meer. We hebben systemen ontworpen voor deze typen experimenten op larvale en volwassen zebravissen, waaronder Noldus DanioVision en speciale EthoVision-videotrackingsoftware, Noldus Danioscope en de Loligo-temperatuurvoorkeuropstelling.

Daarnaast hebben functionele gedragsproeven, zoals optokinetische reacties, akoestische en mechanische schrikreflexen, elektroretinogrammen en motorische visuele reacties, hun waarde meerdere keren bewezen.

Microscopie en afbeelden

Geavanceerde microscopietechnieken maken visualisatie en beeldvorming van een breed scala aan biologische processen en kenmerken in weefsels en cellen mogelijk. We beschikken over verschillende soorten standaard en geavanceerde microscopische toepassingen, zowel in onze eigen faciliteit als via de afdeling Gemeenschappelijk Instrumentarium van FNWI. Externe groepen kunnen ook aanvragen om onze microscopen te gebruiken en gebruik maken van technische ondersteuning.

Licht- en fluorescentiemicroscopie
Confocale microscopie
Digitale lichtplaatmicroscopie
Scanning en transmissie-elektronenmicroscopie (inclusief de benodigde apparatuur voor materiaalvoorbereiding, zoals microtomen en vriesetssystemen)

Binnenkijken bij de Radboud Zebrafish Facility

Veiligheid en ethiek

Alleen gecertificeerde medewerkers en onderzoekers hebben geautoriseerde toegang tot de faciliteit. De verzorging en het welzijn van de vissen zijn onderworpen aan een reeks nationale en internationale wetten en voorschriften. In ons dagelijks werk besteden we actieve aandacht aan het welzijn van onze vissen, waarbij we verder gaan dan het naleven van wettelijke normen en voorschriften. Zo houden we ons binnen ons platform aan zelfopgestelde strikte protocollen voor optimale dichtheden, regelmatige gezondheidsinspecties en verantwoordelijke anesthesie en euthanasie van onze vissen.

Het hanteren, experimenteren en genetisch manipuleren/wijzigen van zebravissen heeft duidelijke ethische implicaties, waarvan sommige betrekking hebben op dierenwelzijn. Deze kwesties moeten door alle deelnemers in overweging worden genomen. Onze facilitair manager is in nauw contact met het Dierwelzijnsorgaan van de universiteit. Samen houden zij toezicht op de juiste naleving van wettelijke voorschriften en dragen zij bij aan geavanceerde verfijning, vervanging en vermindering van het gebruik van proefdieren.

Onze faciliteiten zijn goedgekeurd voor het huisvesten en gebruiken van genetisch gemodificeerde dieren. Hiervoor worden regelmatig rapporten en inspecties uitgevoerd door de betrokken instanties.

Contact & toegang

De Radboud Zebrafish Facility bevindt zich in de kelder van het Huygensgebouw.

Heb je interesse om samen te werken met de Radboud Zebrafish Facility? Neem dan contact op met dr. Juriaan Metz en vermeld welke soort samenwerking je interesse heeft en welk onderzoeksgebied je zou willen onderzoeken.

Contactafdeling

Radboud Institute for Biological and Environmental Sciences

Contactpersoon

dr. J.R. Metz (Juriaan)